泰國S&A沙門氏菌診斷血清套裝

泰國SA公司診斷血清

試驗方法

O抗原檢測步驟

       將沙門氏菌接種到非選擇性瓊脂培養(yǎng)基上，35-37℃培養(yǎng)18-24小時。

1. 滴一滴生理鹽水（0.85%氯化鈉）于潔凈載玻片上作為對照。從非選擇性瓊脂培養(yǎng)基平板上取一滿環(huán)培養(yǎng)物與載玻片上生理鹽水混合。30S內(nèi)凝集表明是粗糙型菌株。該菌株不能用于血清學(xué)分型。如果不凝集繼續(xù)進行血清學(xué)分型并記錄。
2. 滴一滴沙門氏菌抗血清于潔凈載玻片的測試區(qū)域。從非選擇性瓊脂培養(yǎng)基平板上取一滿環(huán)培養(yǎng)物于抗血清上。將培養(yǎng)物與抗血清充分混合，輕輕晃動載玻片1分鐘。如果凝集表明菌株含有這種抗血清中特定的一種O抗原。

說明：

        首先用O多價血清進行凝集，如果菌株與O多價血清發(fā)生凝集，則繼續(xù)使用O多價血清中包含的相應(yīng)的群血清進行測定。如果菌株與某一O群血清發(fā)生凝集，則繼續(xù)使用該群包含的單因子抗血清進行測試。

Vi抗原檢測步驟

       一些傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒沙門氏菌和都柏林沙門氏菌可能出現(xiàn)與O抗血清不凝集，必須使用Vi抗血清進行測定。從營養(yǎng)瓊脂（NA）、胰胨大豆瓊脂（TSA）或三糖鐵瓊脂（TSI）上挑取新鮮培養(yǎng)物進行Vi抗血清測定。如果試驗結(jié)果顯示此培養(yǎng)物能與Vi抗血清發(fā)生凝集反應(yīng)而不能與O抗血清發(fā)生凝集反應(yīng)，則取兩環(huán)培養(yǎng)物懸浮于1mL普通生理鹽水中（NSS0.85%），100℃沸水浴15-60分鐘以破壞Vi抗原。取沉淀物用O抗血清重新進行玻片凝集試驗，應(yīng)該是顯示陽性結(jié)果。

H抗原檢測步驟（Sven Gard技術(shù)）

       挑取非選擇性瓊脂培養(yǎng)基上的培養(yǎng)物一環(huán)點種于Swarm Agar平板中間，35-37℃培養(yǎng)18-24小時。有動力的菌株在Swarm Agar平板表面蔓延生長。

1. 分別滴一滴生理鹽水和一滴H抗血清于載玻片的兩個測試區(qū)域。
2. 用接種環(huán)從Swarm Agar點種區(qū)邊緣挑取培養(yǎng)物，分別與生理鹽水和H抗血清充分混合。
3. 輕微搖動載玻片30s至1min，觀察反應(yīng)結(jié)果，菌株不應(yīng)與生理鹽水凝集。
4. 應(yīng)先依次使用H多價抗血清進行測定。

對試驗結(jié)果的解釋

于1分鐘內(nèi)呈明顯凝集者為陽性，呈均勻乳白色混濁者為陰性。

注意事項

1. 被檢菌應(yīng)首先用O多價血清及O因子血清鑒定其O抗原，在必要時以Vi血清鑒定其Vi抗原，然后以H血清鑒定其鞭毛抗原，參考沙門氏菌屬診斷抗原表，并根據(jù)生化反應(yīng)特性，做出菌型診斷。
2. 生化反應(yīng)符合沙門氏菌定義，但與O多價血清不凝集或用本組血清不能定型的菌株，可送往有條件定型的機構(gòu)，做出菌型鑒定。
3. 血清已用生理氯化鈉溶液稀釋，使用時不必再做稀釋。
4. 防止凍結(jié)，在有效期內(nèi)使用。

包裝和規(guī)格

紙盒包裝，每盒60種，共計60瓶（多價血清2Ml/瓶，單因子血清1Ml/瓶）。

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沙門氏菌的抗原分為菌體抗原(O)、鞭毛抗原（H）、莢膜抗原（K、Vi）、纖毛抗原。O抗原O抗原存在于菌體細(xì)胞壁zui外層，化學(xué)成分為類脂-多糖-多肽復(fù)合物，由多糖決定其特異性。O抗原耐熱、醇和酸，100～121℃加熱2.5h、用乙醇或鹽酸處理而不失去抗原性，因此菌體抗原已經(jīng)被*為沙門氏菌血清型分型的基礎(chǔ)。