肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法）使用說明書

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【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法）

商品名稱：Binax NOW^® Streptococcus pneumoniae Test

【包裝規(guī)格】22人份/盒。

【預(yù)期用途】

肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法）是一種體外快速免疫層析（ICT）試驗(yàn)，用于檢測肺炎病人尿液和腦膜炎病人腦脊液（CSF）中的肺炎鏈球菌抗原，與培養(yǎng)等其他方法結(jié)合，用于肺炎球菌性肺炎和肺炎球菌性腦膜炎的輔助診斷。

肺炎鏈球菌是社區(qū)獲得性肺炎的主因，并且可能是不明原因社區(qū)獲得性肺炎的重要致病原^{1, 2}。肺炎球菌性肺炎的病死率高達(dá)30%，這取決于菌血癥、年齡和潛在性疾病^{1, 3}。如果未得到正確診斷和治療，肺炎鏈球菌感染可導(dǎo)致菌血癥、腦膜炎、心包炎、膿胸、暴發(fā)性紫癜、心內(nèi)膜炎和/或關(guān)節(jié)炎^{4, 5}。

肺炎球菌性腦膜炎常導(dǎo)致不可逆轉(zhuǎn)的腦損傷或腦死亡，它既可作為其他肺炎球菌感染的并發(fā)癥出現(xiàn)，也可單獨(dú)出現(xiàn)⁶。各個(gè)年齡段人群均可感染，但更常見于5歲以下兒童、青少年和老年人⁷。病程進(jìn)展快速，數(shù)小時(shí)內(nèi)可從輕度疾病轉(zhuǎn)為昏迷，這就使得即刻做出診斷，立即動用抗菌素進(jìn)行治療顯得尤為重要。盡管采用了適當(dāng)?shù)目股刂委煄滋旌筮€是會有20%-30%的肺炎球菌性腦膜炎病人會死掉⁶。病死率在小兒和高齡病人中甚至更高⁶。

Binax NOW^®肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法）為肺炎球菌性肺炎的診斷提供了一種簡便快速的診斷方法，該方法所用檢測樣品為尿液，尿液的收集、貯存和運(yùn)輸都非常方便，該實(shí)驗(yàn)通過對腦脊液進(jìn)行檢測也可對肺炎球菌性腦膜炎做出及時(shí)高度準(zhǔn)確的診斷。 

【檢驗(yàn)原理】

肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法）是一種薄膜免疫層析試驗(yàn)，用于檢測人類尿液和腦脊液中肺炎球菌的可溶性抗原。兔抗肺炎鏈球菌抗體被吸附到硝酸纖維素膜上作為樣本線，對照抗體作為另一條線吸附到同一膜上。結(jié)合有可視粒子的兔抗肺炎鏈球菌抗體和抗種抗體干燥結(jié)合到惰性纖維支持物上，形成的結(jié)合物墊和帶條紋的膜結(jié)合到一起組成檢測條。檢測條和放拭子標(biāo)本的孔位于一個(gè)書形鉸鏈狀檢測卡的兩側(cè)。 

試驗(yàn)時(shí)，將拭子浸入標(biāo)本中（尿液或腦脊液），取出，然后插入檢測卡中，從滴瓶中加入A試劑（一種緩沖液），將檢測卡閉合，使樣本和檢測條相觸。樣本中存在的肺炎球菌抗原與抗肺炎鏈球菌抗體結(jié)合物結(jié)合，形成的抗原結(jié)合物復(fù)合物被固定的抗肺炎鏈球菌抗體捕獲，形成樣本線。固定的對照抗體捕獲種屬抗體結(jié)合物，形成對照線。 

試驗(yàn)結(jié)果可通過紫紅色線的出現(xiàn)與否來解釋。陽性結(jié)果（取決于標(biāo)本中存在的抗原濃度）在15分鐘讀數(shù)時(shí)，會檢測出樣本線和對照線。陰性結(jié)果，15分鐘讀數(shù)時(shí)只出現(xiàn)對照線，表示標(biāo)本中未檢測到肺炎鏈球菌抗原。如果對照線未出現(xiàn)，不管標(biāo)本線出現(xiàn)與否，都視為無效結(jié)果。

【檢驗(yàn)方法】

檢測肺炎球菌肺炎時(shí)用尿液標(biāo)本，檢測肺炎球菌性腦膜炎時(shí)用腦脊液標(biāo)本。

注：測試液性標(biāo)本時(shí)用3滴A試劑。

1．   將病人標(biāo)本和/或液狀對照品放至室溫（15-30℃），輕輕混勻。測試前從包裝袋中取出檢測卡平放。

2．   將1根Binax樣本拭子浸入要測試的標(biāo)本中，*浸沒拭子頭。如果拭子有滴水，將拭子靠在收集容器的邊上，排去多余的液體。

3．   檢測卡內(nèi)部的右手邊有兩個(gè)孔，將拭子插入底部的孔中（拭子孔），穩(wěn)步向前推，使整個(gè)拭子頭在上部的孔中可見，不要取出拭子。

4．   垂直持放A試劑瓶，高出檢測卡上方1/2到1英寸，慢慢向底部的孔中加入3滴A試劑。

5．   立即從檢測卡的右緣揭去粘附襯，封閉檢測卡，過15分鐘在窗口判讀結(jié)果。15分鐘后讀取的結(jié)果可能不準(zhǔn)確。然而，有些陽性病人不到15分鐘就出現(xiàn)可見樣品線。

注意：只能使用本試劑盒提供的樣本拭子，不要使用其它拭子。為方便起見，在拭子柄上做了切痕，在閉合檢測卡時(shí)可能會將拭子柄折斷。操作時(shí)不要使拭子柄從孔中脫出。

質(zhì)量控制

日常質(zhì)量控制：

Binax NOW^®肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法）中含有陽性和陰性過程對照品。作為日常質(zhì)量控制，制造商的zui低要求是：每天的第1份樣本都要記錄過程對照結(jié)果。 

陽性過程對照

對照位置的紫紅色線可被看作是內(nèi)部陽性過程對照，如果毛細(xì)管流動暢通，檢測卡功能完整，這條線始終會出現(xiàn)。 

陰性過程對照

結(jié)果窗口的清晰背景色是陰性背景對照。窗口的背景色在15分鐘內(nèi)應(yīng)當(dāng)是淡紫紅色到白色，不應(yīng)干擾結(jié)果的判讀。 

外在陰陽性對照：

良好試驗(yàn)室操作規(guī)范建議用陰陽性對照來保證試劑的功效和操作正確。監(jiān)測整個(gè)反應(yīng)的陰性拭子和陽性拭子試劑盒中都有提供，應(yīng)當(dāng)用對照拭子測定程序測定。每打開一個(gè)試劑盒都要做拭子對照，這也是你所在實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量控制程序要求的。其他對照可根據(jù)地方、州和/或聯(lián)邦法規(guī)或鑒定組織的要求進(jìn)行。 

如果沒有獲得預(yù)期對照結(jié)果，請不要報(bào)告病人結(jié)果。檢查操作步驟，重做對照測試或與Inverness Medical。

對照拭子程序

Binax NOW^®拭子對照

注意：對照拭子用6滴A試劑

1．   用前將檢測卡從包裝袋中取出，平放。

2．   在檢測卡的右手邊有2個(gè)孔，將拭子插入底部的孔中，平穩(wěn)向前推使拭子頭在上部的孔中*可見，不要取出拭子。

3．   垂直持A試劑瓶，高于檢測卡1/2到1英寸，慢慢加入6滴A試劑到底部的孔中。

4．   立即從檢測卡的右緣揭去粘附襯，封閉檢測卡，15分鐘時(shí)在窗口中讀取結(jié)果。超過15分鐘讀取的結(jié)果可能不準(zhǔn)確。然而，陽性對照拭子樣本線15分鐘內(nèi)就可能看到。

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

 【檢驗(yàn)方法的局限性】

Binax NOW^®肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法）僅用尿液和腦脊液標(biāo)本驗(yàn)證過，其他可能含有肺炎鏈球菌抗原的標(biāo)本（例如血漿或其他體液）尚未進(jìn)行過評價(jià)。 

Binax NOW^®試驗(yàn)陰性不能排除肺炎鏈球菌感染，因此，該項(xiàng)結(jié)果，還有培養(yǎng)結(jié)果，血清學(xué)或其他抗原檢測方法學(xué)應(yīng)當(dāng)結(jié)合臨床結(jié)果作出準(zhǔn)確診斷。 

未對服用抗生素超過24小時(shí)的病人或新近完成一個(gè)抗菌治療的病人用Binax NOW^®肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法）進(jìn)行過評價(jià)，也未對非處方藥對肺炎球菌性腦膜炎病人的影響進(jìn)行確定。 

使用肺炎鏈球菌疫苗后48小時(shí)內(nèi)可能對尿液中 Binax NOW^®肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法）造成假陽性結(jié)果。疫苗對肺炎球菌腦膜炎患者的影響未做確定。因此，建議使用肺炎鏈球菌疫苗后5天內(nèi)不要進(jìn)行Binax NOW^®肺炎鏈球菌檢測。

Binax NOW^®試驗(yàn)對小兒尿液的準(zhǔn)確性還未得到證實(shí)，另一方面，對小兒腦脊液的性能已得到了證實(shí)（見腦脊液-性能數(shù)據(jù)）。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

性能數(shù)據(jù)-尿液

分析敏感性

血清型評估

代表23個(gè)肺炎鏈球菌血清型的44株分離菌株引起了美國乃至*90%以上肺炎球菌感染。他們都在培養(yǎng)基上生長且在10⁵細(xì)胞

/ml時(shí)Binax NOW^®試驗(yàn)陽性。 

檢測限

NOW^®試驗(yàn)的檢測限（LOD）定義為95%的次數(shù)出現(xiàn)陽性結(jié)果的陽性尿液的稀釋度，是通過將已知病人陽性尿液標(biāo)本做多倍稀釋并用NOW^®試驗(yàn)進(jìn)行檢測而確定的。 

每個(gè)稀釋度共做100-200次測定，5個(gè)操作者對每個(gè)稀釋度的20-40個(gè)檢測卡進(jìn)行解釋。下列結(jié)果把1:250稀釋度作為NOW^®試驗(yàn)的檢測限。

臨床敏感性和特異性（回顧性研究）

作為回顧性研究的一部分，在3家機(jī)構(gòu)中，收集了35份血培養(yǎng)陽性肺炎球菌肺炎病人和338份血培養(yǎng)陰性肺炎球菌肺炎病人的尿標(biāo)本（共373個(gè)病人），用Binax NOW^®試驗(yàn)進(jìn)行評估。 用標(biāo)準(zhǔn)方法推算Binax NOW^®試驗(yàn)性能。敏感性是86%，特異性為94%，總準(zhǔn)確度是93%，95%可信區(qū)間如下所示。

血   培養(yǎng)

+     —

NOW®  +                                        

結(jié)果    —                           

敏感性=86%     （71%-94%）

特異性=94%     （91%-96%）

準(zhǔn)確度=93%     （90%-95%）

臨床敏感性和特異性（前瞻性研究）

分別在7個(gè)中心進(jìn)行的前瞻性研究中，從有下呼吸道癥狀或膿毒癥的住院和門診病人以及其他可疑肺炎球菌肺炎病人中收集了215份尿標(biāo)本，對Binax NOW^®試驗(yàn)進(jìn)行了評估。血培養(yǎng)陽性的病人被視為有肺炎球菌肺炎。 

用Binax NOW^®試驗(yàn)對住院病人和門診病人進(jìn)行了同等測試。95%可信區(qū)間如下。

門診性能

血   培養(yǎng)

+     -

NOW®  +                                        

結(jié)果     -                          

敏感性=90%     （70%-97%）

特異性=78%     （70%-85%）

準(zhǔn)確度=80%     （72%-86%）

住院病人性能

血   培養(yǎng)

+     -

NOW®  +                                        

結(jié)果     -                          

敏感性=90%     （60%-98%）

特異性=71%     （59%-80%）

準(zhǔn)確度=73%     （62%-82%）

交叉反應(yīng)性

尿液檢測

在上面的回顧性研究中，從338位陰性病人中分離出270種微生物。165種分離自尿道感染病人的微生物中，15種（9%）產(chǎn)生了陽性結(jié)果：2/2陰溝腸桿菌，1/2金黃色葡萄球菌，1/1鏈球菌（非A非B群），1/1鏈球菌（非D群），1/17鏈球菌（D群），1/3斯氏普羅威登斯菌，5/78大腸埃希氏菌，3例未鑒定菌。從肺炎病人分離出的59株細(xì)菌中，3株（5%）是陽性的，包括1/3堪薩斯分枝桿菌和2/15結(jié)核分枝桿菌。從菌血癥病人分離的41例微生物中1例（2%）奇異變形桿菌產(chǎn)生的結(jié)果是陽性的。與5例膿胸分離菌無交叉反應(yīng)性。zui后，從不明原因感染病人收集的尿標(biāo)本中4/100是陽性的。

由于本研究是回顧性的，進(jìn)行測試的各種感染病人的數(shù)量是有限的，且各人的病史不祥，因此，不能排除存在肺炎鏈球菌混合感染的情況。當(dāng)用純培養(yǎng)進(jìn)行測試時(shí)（資料如下），這些微生物在NOW^®試驗(yàn)中均未產(chǎn)生交叉反應(yīng)性。 

全微生物檢測

為了確定Binax NOW^®試驗(yàn)的分析特異性，收集了144份交叉反應(yīng)物，包括與肺炎有關(guān)的微生物和那些可能作為正常菌群在泌尿生殖道發(fā)現(xiàn)的微生物，以及引起尿道感染的微生物。所有微生物都在10⁶到10⁹CFU/ml用Binax NOW^®試驗(yàn)進(jìn)行了評估，在144例微生物中有143例無交叉反應(yīng)性，*陽性的微生物是緩和鏈球菌，由于它和Binax NOW^®試驗(yàn)有共同抗原，交叉反應(yīng)是可預(yù)期的。緩和鏈球菌與心內(nèi)膜炎有關(guān)，而非肺炎，不可能頻繁出現(xiàn)在NOW^®試驗(yàn)測試人群中⁸。下列生物經(jīng)過測試且結(jié)果為陰性。當(dāng)檢測出不止一株時(shí)，用數(shù)字列在括號內(nèi)。 

不動桿菌（4）莢膜組織胞漿菌*（2）普通變形桿菌（2）

腺病毒*產(chǎn)酸克雷白菌 （2）斯氏普羅威登斯菌 糞產(chǎn)堿桿菌

肺炎克雷白菌（3）假單胞菌屬 （7）乳酸桿菌 （5）

呼吸道合胞病毒* 皮炎芽生菌*  嗜肺軍團(tuán)菌 鼻病毒*

百日咳鮑特菌  產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌  沙門菌 （4）卡他布蘭漢菌

Luteus細(xì)球菌 （2）黏質(zhì)沙雷氏菌 白色假絲酵母菌 （3）奧斯陸莫拉菌

鞘胺醇桿菌屬 multivorum 星形假絲酵母菌 摩根菌 金黃色葡萄球菌

厭氧球孢子菌* 堪薩斯分枝桿菌 葡萄球菌 （8）棒狀桿菌屬 （3）

結(jié)核分枝桿菌  寡養(yǎng)單胞菌屬 陰溝腸桿菌 （4）

支原體* （3）咽頰鏈球菌 ◊● avium腸球菌◊ 灰色奈瑟氏菌

牛鏈球菌 ◊ durans腸球菌◊ 淋病奈瑟氏菌

A群鏈球菌● 糞腸球菌 ◊ lactamica奈瑟氏菌 B群鏈球菌◊●

（8）大腸埃希氏菌 （8）腦膜炎奈瑟氏菌 C群鏈球菌◊●

Escherichia hemannii （2）多糖奈瑟菌  F群鏈球菌◊● 黃桿菌屬

（2）淺黃色奈瑟氏菌 G群鏈球菌◊●  陰道加德鈉氏菌  諾卡菌屬*

變異鏈球菌 ◊● 流感嗜血桿菌  （10）巴西副球孢子菌*

副血鏈球菌 ◊● 副流感病毒 *  （2）

血鏈球菌◊● 副流感暑血桿菌（2）

陰道毛滴蟲（2）

*來自CDC的純培養(yǎng)，據(jù)認(rèn)定為高濃度。

◊非A非B鏈球菌（總株數(shù)是16）

●非D群鏈球菌（總株數(shù)是17）

干擾物質(zhì)

用Binax NOW^®肺炎鏈球菌試驗(yàn)對白細(xì)胞數(shù)（每低倍鏡視野的數(shù)量）、紅細(xì)胞數(shù)（每低倍鏡視野的數(shù)量）*、蛋白（500mg/dl）、糖（＞2000 mg/dl）、混濁度升高的尿液標(biāo)本進(jìn)行了評估，發(fā)現(xiàn)對試驗(yàn)性能沒有造成影響。

*注：一份含有較多紅細(xì)胞的尿液由于檢測膜的過度顯色掩蓋了線條的出現(xiàn)產(chǎn)生了無效結(jié)果。

重復(fù)性研究

分別在3家床邊護(hù)理機(jī)構(gòu)用一組含陰性、弱陽性、陽性、強(qiáng)陽性的單盲編碼標(biāo)本對Binax NOW^®肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法）進(jìn)行單盲研究。含有硼酸和不含硼酸的樣本都進(jìn)行了測試。參與者在3天內(nèi)對每一標(biāo)本進(jìn)行多次測試。359份測試標(biāo)本中有357份（99.4％）產(chǎn)生了預(yù)期結(jié)果。 

腦脊液性能資料

分析敏感性

檢測限

NOW^®試驗(yàn)的檢測限（LOD）通過NOW^®試驗(yàn)中多次測定肺炎鏈球菌稀釋液而確立。 

對每個(gè)稀釋度做100次測定，由10個(gè)操作者對每個(gè)稀釋度的10個(gè)檢測卡進(jìn)行解釋。下面的結(jié)果把5×10⁴細(xì)胞/ml作為 NOW®試驗(yàn)的檢出限。

血清學(xué)評價(jià)

將在培養(yǎng)基上生長的與肺侵襲性疾病相關(guān)的zui常見的4個(gè)血清型（6，14，19，23）用腦脊液稀釋至5×10⁴細(xì)胞/ml，并用Binax NOW^®試驗(yàn)測試。14個(gè)操作者每人對每個(gè)血清型的10個(gè)檢測卡結(jié)果進(jìn)行解釋，共計(jì)解釋140個(gè)檢測卡，所有這4個(gè)血清型在檢測限（5×10⁴細(xì)胞/ml）100％被檢測了出來。 

臨床敏感性和特異性

在一個(gè)多中心（4）的前瞻性研究中， 用Binax NOW^®試驗(yàn)對590例有腦膜炎癥狀或打算做腰穿刺的住院和門診病人的腦脊液標(biāo)本進(jìn)行評估。腦脊液培養(yǎng)陽性的病人視為有肺炎球菌性腦膜炎。 

用標(biāo)準(zhǔn)方法對 Binax NOW^®的試驗(yàn)性能進(jìn)行推算，特異性是99%（557/560），95%可信區(qū)間是98%-100%，敏感性是97%（29/30），95%可信區(qū)間是84%-100%。Binax NOW^®試驗(yàn)未檢測出來的*培養(yǎng)陽性標(biāo)本據(jù)報(bào)道只產(chǎn)生了2個(gè)菌落。 

腦脊液  培養(yǎng)

+       -

NOW eq \o\ac（○,R）R  +                                         

結(jié)果     -                           

敏感性=97%     （84%-100%）

特異性=99%     （98%-100%）

準(zhǔn)確度=99%     （98%-100%） 

交叉反應(yīng)性

腦脊液檢測

在上面的前瞻性研究中，肺炎鏈球菌陰性腦脊液標(biāo)本中的61份分離出了腸病毒或細(xì)菌，其中60份用 Binax NOW eq \o\ac（○,R）R試驗(yàn)檢測陰性，，特異性是98%，*陽性標(biāo)本含有腸球菌。然而，另一份含腸球菌的腦脊液用Binax NOW^®試驗(yàn)測試結(jié)果為陰性， 同全微生物培養(yǎng)結(jié)果*（全微生物檢測參下）

全微生物檢測

除了在前瞻性研究中遇室的細(xì)菌和病毒感染， Binax搜集了一組潛在交叉反應(yīng)物，包括zui常見的細(xì)菌性和病毒性腦膜炎致病因子，在 Binax NOW^®試驗(yàn)中對濃度范圍從10⁷到10⁸CFU/ml的所有細(xì)菌進(jìn)行了評估，對病毒在大于或等于10⁵I.U./ml水平進(jìn)行了測試。 Binax NOW^®試驗(yàn)顯示的特異性是100%，所有參加測試的病毒和細(xì)菌產(chǎn)生的結(jié)果均為陰性。

Burkitt^,s 淋巴瘤（Epstein Barr）     嗜血桿菌

柯薩奇A7病毒                非典型（35891）

柯薩奇B3病毒                單純皰疹病毒1型

?？刹《尽?nbsp;                  單純皰疹病毒2型

糞腸球菌                     產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌（19115）

A群流感嗜血桿菌             產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌（19424）

B群流感嗜血桿菌             腦膜炎奈瑟氏菌A血清型

C群流感嗜血桿菌           0  腦膜炎奈瑟氏菌B血清型

D群流感嗜血桿菌             腦膜炎奈瑟氏菌C血清型

E群流感嗜血桿菌             腦膜炎奈瑟氏菌D血清型

F群流感嗜血桿菌             腦膜炎奈瑟氏菌L血清型

流感嗜血桿菌                 口腔鏈球菌（35037）

非典型（51997） 

干擾物質(zhì)

有較高白細(xì)胞（1×10⁴細(xì)胞/ml），紅細(xì)胞（30細(xì)胞/μl）蛋白（3g/dl），膽紅素（100μg/ ml）的腦脊液標(biāo)本用Binax NOW^®肺炎鏈球菌檢測試驗(yàn)進(jìn)行評價(jià)，未發(fā)現(xiàn)對試驗(yàn)性能有影響。 

重復(fù)性研究

分別在3家實(shí)驗(yàn)室對一組包括陰性、弱陽性、陽性樣本的標(biāo)本單盲編號，用 Binax NOW^®肺炎鏈球菌檢測試驗(yàn)進(jìn)行單盲研究。3天中對每一樣本進(jìn)行多次測定。270份樣本100%得到了預(yù)期結(jié)果。

【注意事項(xiàng)】

對照拭子需要加6滴A液，病人標(biāo)本需要加3滴A液。

1．  無效結(jié)果，無對照線出現(xiàn)，A液加量不足時(shí)會出現(xiàn)。一定要加入足夠量液體，將小瓶垂直持于拭子孔上方1/2-1英寸處，慢慢滴加，使液體自由落下。

2．  僅供體外診斷用。

3．  檢測卡密封在包裝袋中，如果包裝破損或開封，請不要使用。用前從包中取出檢測卡，不要觸摸檢測卡的反應(yīng)區(qū)。

4．  不要使用過期試劑。

5．  不要將不同批號試劑混合使用。

6．  使用試劑盒中提供的拭子。不要使用其他拭子。

7．  盡管制備對照拭子的溶液用標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行了滅活，病人樣本、對照品和檢測卡仍應(yīng)視為能傳播疾病的物質(zhì)，遵照已建立的預(yù)防微生物危害的措施做適當(dāng)處理。

8．  此試驗(yàn)所用尿液標(biāo)本不要求必須是清潔的，因此，用于該試驗(yàn)的標(biāo)本可能不適于做細(xì)菌培養(yǎng)。

9．  一旦拭子浸入腦脊液標(biāo)本中，樣本不再是無菌的，可能不再適于做細(xì)菌培養(yǎng)。如果腦脊液標(biāo)本要做培養(yǎng)，要么先做培養(yǎng)，要么將腦脊液標(biāo)本分開。

【中國地區(qū)總代理企業(yè)】

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